Toplam rAAV partikül konsantrasyonunun hızlı, etiketsiz, tahribatsız, düşük hacimli belirlenmesi
Rekombinant Adeno-İlişkili Virüsler (rAAV), gen terapilerinin geliştirilmesinde yoğun olarak araştırılan, iyi incelenmiş bir viral vektör sınıfıdır. Kontrollü ve ekonomik üretim süreçleri ile üretilen etkin rAAV terapilerini geliştirmek için, birçok zorluğun ele alınması gerekmektedir. rAAV’ler genelikle büyük biyoreaktörlerde işlenmiş hücre hatlarında üretilir. Hücre içinde üretildikten sonra, rAAV parçacıkları lizis (hücre yıkımı) ile serbest bırakılır ve daha sonra çoklu izolasyon basamaklarından geçirilerek yığından izole edilir; örneğin, yoğunluk gradyanlı santrifüjleme, iyon değişim kromatografisi ve teğetsel akış filtrasyonu. Akış aşağı saflaştırma süreci boyunca; verimin, etkinliğin ve güvenlik gibi temel analitik niteliklerin yanı sıra sürecin anlaşılmasını ve kontrol edilmesini sağlamak için çoklu analizler yapılır. Bu parametreler bunlarla sınırlı olmamakla birlikte genellikle aşağıdaki gibidir: kapsid veya partikül sayımı, genom sayımı, % genom-içeren veya % tam rAAV parçacıkları, serotip karakterizasyonu, partikül boyutu, agregasyon seviyesi ve istenmeyen konakçı hücre proteinleri ve nükleotilerin varlığı. İlk üç parametre (kapsid veya partikül sayımı, genom sayımı, % genom-içeren veya % tam rAAV parçacıkları) genellikle aşağıdaki testlerin iki veya daha fazlası kullanılarak ölçülür: qPCR, ELISA, AUC, HPLC-AEX ve/veya TEM. Her yöntemin, ölçülen parametre, istenen verim, doğruluk ve numune hacmi gereklilikleri ile ilgili kendine özgü güçlü ve zayıf yönleri vardır. Çok Açılı Dinamik Işık Saçılımı (MADLS), agregasyon, kapsid yükü ve partikül konsantrasyonu dahil olmak üzere birden fazla rAAV parametresini aynı anda ölçebilen eşsiz bir tekniktir. Toplam rAAV partikül konsantrasyonunun hızlı, etiketsiz, tahribatsız, düşük hacimli belirlenmesi için mevcut analitik iş akışlarında kullanılabilen tamamlayıcı bir test olarak çok uygundur. Bu web seminerinde, Malvern Panalytical'den Jonathan Mehtala, MADLS ölçüm prensibini ve bu yeni yöntemin rAAV model örneklerinin karakterizasyonuna ve ayrıca rAAV tedavilerinin geliştirilmesine uygulanmasını tartışacaktır. rAAV partiküllerinin viral konsantrasyonu ve boyutu ile ilgili veriler ile birlikte malzeme kırılma indisi ve viskozite gibi numune özelliklerinin etkileri de tartışılacaktır. Allergan'dan Kirsty McManus; bunu, ilaç maddesi ve proses geliştirme örneklerinin çoklu serotip rAAV analizi vaka çalışmalarının gerçek dünya örnekleri ile takip edecektir.
Temel Öğrenme Hedefleri
• DLS analizine yeni bir yaklaşım olan MADLS'e giriş yapın
• Viral vektör üretimi ve geliştirme desteği için MADLS'i analitik araç kutusuna hoş bir ek yapan nedir öğrenin
• Viral vektör analizinde MADLS kullanımı için en iyi uygulamaları ve önemli hususları keşfedin
- rAAV model örneklerine dayalı analitik iş akışlarına ve ayrıca geliştirmedeki rAAV terapilerine nasıl uygulandığını öğrenin
- Date:
- 23/04/2020
- Time:
-
17:30 - 18:30
- Ülke:
- United Kingdom
- Etkinlik Türü:
- Webinar
- Dil:
- English
